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(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210652954.5 (22)申请日 2022.06.10 (71)申请人 东莞理工学院 地址 523808 广东省东莞 市松山湖大 学路1 号 (72)发明人 王际辉 李娜 肖珊 王晗 (74)专利代理 机构 北京睿智保诚专利代理事务 所(普通合伙) 11732 专利代理师 刘晓静 (51)Int.Cl. C07K 14/435(2006.01) C12N 15/12(2006.01) C12N 15/13(2006.01) C12N 15/70(2006.01) C12N 15/66(2006.01)C07K 16/18(2006.01) C12N 15/11(2006.01) C12R 1/19(2006.01) (54)发明名称 一种仿刺参整合素多克隆抗体、 抗原蛋白及 其制备方法 (57)摘要 本发明提供了一种仿刺参整合素多克隆抗 体、 抗原蛋白及其制备方法, 属于抗体制备技术 领域, 本发明成功得到了仿刺参整合素抗原蛋 白, 将其免疫小鼠后能够成功得到仿刺参整合素 多克隆抗体, 克服了现有技术中缺少仿刺参整合 素抗体的问题, 为仿刺参的生物学研究提供有意 义的工具和实验支持。 本发明还成功得到了仿刺 参整合素抗原蛋白的编码基因、 重组表达载体, 通过本发明提供的制备方法能够制得仿刺参整 合素抗原蛋白。 本发明还提供了仿刺参整合素β G基因编码区全序列, 填补了相关研究的空白, 通 过本发明引物对能够成功扩增出上述仿刺参整 合素βG基因编码区全序列, 可用于仿刺参整合 素的其他相关研究。 权利要求书1页 说明书8页 序列表5页 附图3页 CN 114907468 A 2022.08.16 CN 114907468 A 1.一种仿刺参整合素抗原蛋白, 其特征在于, 所述仿刺参整合素抗原蛋白的氨基酸序 列如SEQ ID NO.1所示。 2.编码权利要求1所述的仿刺参整合素抗原蛋白的基因, 其特征在于, 所述基因 的核苷 酸序列如SEQ ID NO.2所示。 3.一种仿刺参整合素抗原蛋白的重组表达载体, 其特征在于, 包括权利要求2所述的基 因和初始载体。 4.根据权利 要求3所述的重组表达载体, 其特征在于, 所述初始载体为pCold Ⅱ, 所述基 因插入初始载体的NdeI和Hi ndIII酶切位点之间。 5.权利要求1所述的仿刺参整合素抗原蛋白的制备 方法, 其特 征在于, 包 含如下步骤: 将权利要求3或4所述的重组表达载体转化大肠杆菌、 表达, 得到仿刺参整合素抗原蛋 白。 6.一种仿刺参整合素多克隆抗体, 其特征在于, 所述多克隆抗体是以权利要求1所述的 仿刺参整合素抗原蛋白免疫 小鼠后得到 。 7.仿刺参整合素β G基因编码区全序列, 其特 征在于, 如SEQ ID NO.3所示。 8.一种扩增权利要求7所述仿刺参整合素β G基因编码区全序列的引物对, 其特征在于, 所述引物对的序列如SEQ ID NO.4~5所示。权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 114907468 A 2一种仿刺参整合 素多克隆抗体、 抗原蛋白及其制备方 法 技术领域 [0001]本发明涉及抗体制 备技术领域, 尤其涉及一种仿刺 参整合素多克隆抗体、 抗原蛋 白及其制备 方法。 背景技术 [0002]整合素家族是细胞黏附分子中的一类, 属于跨膜糖蛋白, 在维持组织细胞结构稳 定、 参与细胞黏附反应、 介导细胞间信号传导等方面 发挥重要作用。 整合素是由非共价键结 合的α和β 亚基组成的异质二聚体, 每个亚基都是I型跨膜蛋白, 具有一个保守的结构, 包括 一个较大 的细胞外多结构域部分、 一个单通道跨膜 区域和一个通常较短的细胞质尾部, 能 够与细胞外基质蛋白结合, 并与细胞内信号和细胞骨架复合物结合, 进 行“由外向内 ”和“由 内向外”的双向信号传导, 在 细胞外基质蛋白和细胞内分子之间进行信息交换。 [0003]哺乳动物中的整合素功能及相关调节机制有关研究已相对成熟, 但是目前, 针对 仿刺参整合素蛋白水平的研究较少, 尤其是对仿刺参整合素的抗体制备等研究目前还无相 关报道, 研究制备仿刺参整合素 的抗体, 将为仿刺参的生物学研究提供有意义的工具和实 验支持。 发明内容 [0004]本发明的目的在于提供一种仿刺 参整合素多克隆抗体、 抗原蛋白及其制 备方法, 解决现有技 术中缺少仿刺参整合素抗体的问题。 [0005]为了实现上述发明目的, 本发明提供以下技 术方案: [0006]本发明提供了一种仿刺参整合素抗原蛋白, 所述仿刺参整合素抗原蛋白的氨基酸 序列如SEQ ID NO.1所示。 [0007]本发明还提供了编码上述仿刺参整合素抗原蛋白的基因, 所述基 因的核苷酸序列 如SEQ ID NO.2所示。 [0008]本发明还提供了一种仿刺参整合素抗原蛋白的重 组表达载体, 包括上述述基因和 初始载体。 [0009]优选的, 所述初始载体为pCold Ⅱ, 所述基因插入初始载体的NdeI和HindIII酶切 位点之间。 [0010]本发明还提供了一种仿刺参整合素抗原蛋白的制备 方法, 包含如下步骤: [0011]将上述重组表达载体转 化大肠杆菌、 表达, 得到 仿刺参整合素抗原蛋白。 [0012]本发明还提供了一种仿刺参整合素多克隆抗体, 所述多克隆抗体是以上述仿刺参 整合素抗原蛋白免疫 小鼠后得到 。 [0013]本发明还提供了一种仿刺参整合素β G基因编码区全序列, 如SEQ ID NO.3所示。 [0014]本发明还提供了一种扩增上述仿刺参整合素β G基因编码区全序列的引物对, 所述 引物对的序列如SEQ ID NO.4~5所示。 [0015]本发明的技 术效果和优点:说 明 书 1/8 页 3 CN 114907468 A 3
专利 一种仿刺参整合素多克隆抗体、抗原蛋白及其制备方法
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